عزل وتشخيص المعزز الحيوي الغذائي Saccharomyces boulardii باستعمال الطرائق التقليدية ونظام الفايتك2 والطرائق الجزيئية.

الملخص

هدفت هذه الدراسة الى عزل وتشخيص المعزز الحيوي الغذائي Saccharomyces boulardii من ثمار المانغستين (Garcinia mangostana L.) بطرائق التشخيص التقليدية والتشخيص الجزيئي للحصول على معززات حيوية غذائية امنه الاستعمال وصحية، اخضعت العزلات فضلا عن عزلتين تجاريتين للاختبارات المزرعية والمجهرية والكيموحيوية، اذ أظهرت العزلات مستعمرات ذات شكل دائري بلون ابيض مائل إلى الكريمي الباهت عند تنميتها على الوسط الصلب SD وبدت بشكل محدب ذات حواف منتظمة وقوام كريمي لزج، وان الخلايا تمتلك أشكالا بيضوية، او شبه كروية متبرعمة أحيانا، مفردة او متقاربة في تجمعات، وعدم المقدرة على تمثيل الكالاكتوز فضلا عن سكر اللاكتوز ولم تستطع استهلاك نترات البوتاسيوم او النمو بتركيز 0.01% من المضاد الحيوي السايكلوهكسمايد.
كما شخصت باستعمال نظام الفايتك 2 على انهاSaccharomyces cerevisiae باحتمالية تراوحت بين90– 94%، اذ لا تتضمن بيانات الجهازS. boulardii، ولكون الاختبارات المزرعية والمجهرية والاختبارات الكيموحيوية لا تعطي ادلـــة كافية وقاطـــعة للتفريق بين النوعين S. boulardii وS. cerevisiae، شخص المعزز الحيوي S. boulardii جزيئيا باستعمال بوادئ متخصصة تستهدف التسلسل النوعي الخاص بالمنطقة البينية الفاصلة (ITS) للجين الرايبوسومي 5.8S rRNA، واستخلص الدنا المجيني من العزلة SbR7 التي اظهرت امتلاكها للعديد من صفات المعزز الحيوي والعزلتين التجاريتين، واجري تفاعل تضخيم السلسلة للمنطقة البينية ITS وحددت تعاقبات القواعد النيتروجينية وتمت مقارنتها مع تعاقباته في دنا سلالات S. boulardii المتوفرة في بنك الجينات NCBI باستعمال برنامج BLASTn تبين ان هناك تطابقا للتعاقبات، وان هذه العزلة تتماثل جينيا بنسبة 99% مع سلالات Saccharomyces boulardii القياسية المتوافرة في بنك الجينات.